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TRIzol试剂是分子生物学实验室中最常用的RNA提取试剂。它是一种单相溶液，主要成分包括苯酚和异硫氰酸胍。这些成分能够快速破坏细胞膜，释放细胞内容物，同时强力变性蛋白质，特别是RNase酶，从而有效保护RNA分子不被降解。
RNA提取的前两个关键步骤是匀浆裂解和相分离。首先，将生物样本加入TRIzol试剂中进行充分匀浆，TRIzol中的异硫氰酸胍迅速破坏细胞膜，释放细胞内容物并使RNase失活。接下来加入氯仿并剧烈混匀后离心，溶液会分成三层：上层水相含有RNA，中间层含有DNA，下层有机相含有变性蛋白质。这种分层是基于不同分子在不同溶剂中的溶解性差异。
接下来进行RNA沉淀和洗涤步骤。首先小心取出上层含有RNA的水相，加入等体积的异丙醇，混匀后在低温下孵育，然后高速离心。异丙醇能够降低RNA在水中的溶解度，使RNA形成可见的白色沉淀。随后用75%乙醇洗涤RNA沉淀，这一步骤能够有效去除残留的盐类、苯酚和其他杂质，同时保持RNA的沉淀状态，确保最终获得高纯度的RNA。
最后两个步骤是RNA的干燥和溶解。首先需要小心去除残留的乙醇，可以将离心管倒置在吸水纸上或开盖短暂风干，但要注意不能过度干燥，否则RNA沉淀会变得难以溶解。接下来向干燥的RNA沉淀中加入适量的RNase-free水或TE缓冲液，轻柔地吹打或涡旋混匀，必要时可在55到60摄氏度水浴中短暂加热帮助溶解。最终我们就获得了高质量、高纯度的总RNA，可用于后续的分子生物学实验。