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柯勒照明是显微镜学中的一项重要技术，由德国科学家奥古斯特·柯勒在1893年发明。这种照明方法通过精确调整光路，使照明系统的关键平面与成像系统的关键平面建立共轭关系，从而实现均匀、明亮的视场照明，同时消除光源结构对成像质量的影响。
柯勒照明的核心原理是建立两对共轭关系。第一对是光源平面与物镜后焦平面的共轭，这确保光源的像聚焦在物镜的后焦平面而不是标本平面，从而消除光源结构对成像的影响。第二对是聚光镜孔径光阑与标本平面的共轭，这保证了照明光束能够均匀地照射标本。
柯勒照明系统中有两个重要的光阑。视场光阑位于光源和聚光镜之间，与标本平面共轭，它控制照明区域的大小，通过调整其开口可以限制照明范围刚好覆盖观察视场，从而减少杂散光并提高图像对比度。孔径光阑位于聚光镜内部，与物镜后焦平面共轭，它控制进入物镜的光锥数值孔径，影响图像的分辨率、对比度和景深。
柯勒照明的设置需要按照特定步骤进行。首先聚焦标本，然后关闭视场光阑，调节聚光镜的高度使视场光阑的像清晰聚焦在视场中心。接着逐渐打开视场光阑直到其边缘刚好超出观察视场。最后调节孔径光阑，使其开口约为物镜后焦平面直径的70到80%，以获得最佳的图像质量。正确的设置能够显著提高显微镜的成像效果。
柯勒照明相比传统照明具有显著优势。它能提供均匀的视场照明，完全消除光源灯丝结构对成像的干扰，大幅减少眩光和杂散光。通过精确控制光阑，可以优化图像的对比度、分辨率和景深。这些优点使柯勒照明成为现代显微镜的标准配置，在生物医学研究、材料科学、病理诊断等领域发挥着重要作用，为高质量的显微观察提供了可靠保障。