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ELISA是酶联免疫吸附测定的缩写,英文全称是Enzyme-Linked Immunosorbent Assay。这是一种基于抗原抗体特异性结合原理的免疫学检测方法,广泛用于检测和定量生物样品中的特定蛋白质、抗体、激素等物质。
ELISA的基本原理包括三个核心要素。首先是抗原与抗体的特异性结合,这是免疫反应的基础。其次是酶标记技术,将酶分子连接到抗体上。最后是酶催化底物反应,产生可检测的信号。当酶催化底物发生反应时,会产生颜色变化,信号强度与目标物质的浓度成正比,从而实现定量检测。
ELISA有四种主要类型。直接法ELISA是将抗原直接固定在载体上,用酶标记的抗体进行检测。间接法ELISA使用一抗先结合抗原,再用酶标记的二抗进行检测。夹心法ELISA采用双抗体夹心的方式,特别适用于检测大分子抗原。竞争法ELISA则是让样品中的抗原与标准抗原竞争结合抗体,适用于小分子物质的检测。
ELISA实验包含八个标准步骤。首先是包被,将抗原或抗体固定在载体上。然后封闭,阻断非特异性结合位点。接着加入待检样品,进行特异性结合。第四步洗涤,去除未结合的物质。第五步加入酶标抗体,与目标物质结合。再次洗涤去除多余的抗体。第七步加入底物,酶催化产生颜色反应。最后终止反应并读取结果。
总结一下,ELISA是一种基于抗原抗体特异性结合的免疫检测技术。它通过酶标记和底物反应实现信号放大和检测。ELISA包括直接法、间接法、夹心法和竞争法四种主要类型。实验流程标准化,操作简便,结果可靠。目前ELISA技术已广泛应用于医学诊断、食品安全检测、环境监测等多个重要领域。